Ku-70 Protein DNA修復(fù)酶Ku70抗原是DNA依賴的蛋白激酶(DNA-PK)的調(diào)節(jié)亞基,在DNA修復(fù)過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。其工作原理主要圍繞對DNA雙鏈斷裂(DSBs)的識別與修復(fù)展開。
當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的DNA受到外界因素如電離輻射、化學(xué)試劑等影響,或者在正常的生理過程中出現(xiàn)復(fù)制錯(cuò)誤時(shí),會(huì)導(dǎo)致DNA雙鏈斷裂。此時(shí),Ku70與Ku80結(jié)合形成Ku異二聚體,這一復(fù)合物能夠迅速識別并結(jié)合到DNA雙鏈斷裂的末端。Ku異二聚體具有較高的親和力和特異性,它可以包裹住DNA斷端,防止DNA末端的降解以及不必要的核酸酶切割,從而穩(wěn)定了受損的DNA結(jié)構(gòu)。
在結(jié)合到DNA斷端后,Ku異二聚體招募DNA -PK的催化亞基(DNA -PKcs),形成完整的DNA -PK復(fù)合物。該復(fù)合物能夠使下游的修復(fù)蛋白如ATM(共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥突變蛋白)等相關(guān)蛋白磷酸化,從而激活一系列的信號傳導(dǎo)通路。這些被激活的信號通路會(huì)促進(jìn)非同源末端連接(NHEJ)修復(fù)途徑的進(jìn)行。在NHEJ過程中,Ku70參與調(diào)控DNA斷端的加工處理,例如去除受損的堿基或核苷酸,以確保DNA斷端的準(zhǔn)確性和完整性,為后續(xù)的DNA連接酶發(fā)揮作用創(chuàng)造條件,實(shí)現(xiàn)DNA雙鏈斷裂的準(zhǔn)確修復(fù),維持基因組的穩(wěn)定性。
Ku-70 Protein DNA修復(fù)酶Ku70抗原的使用注意事項(xiàng):
1.抗體質(zhì)量與特異性:
-確保使用的抗體具有高特異性和親和力,以避免非特異性結(jié)合和背景干擾。
-在使用新批次的抗體時(shí),應(yīng)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其性能和特異性。
2.樣本處理:
-樣本的提取和處理過程應(yīng)盡可能溫和,以避免蛋白質(zhì)降解或修飾。
-確保樣本中沒有抑制劑或干擾物質(zhì),這些物質(zhì)可能影響抗原-抗體反應(yīng)的效率。
3.實(shí)驗(yàn)條件控制:
-嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,包括溫度、時(shí)間、pH值等,以確保實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。
-在實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)設(shè)置適當(dāng)?shù)膶φ?如空白對照、陰性對照和陽性對照),以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。
4.數(shù)據(jù)解讀與報(bào)告:
-對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行仔細(xì)分析,避免主觀臆斷或誤讀。
-在報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),應(yīng)提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)和結(jié)論,以便他人能夠重復(fù)驗(yàn)證。
5.安全與環(huán)保:
-在實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定,正確處理和使用化學(xué)試劑和生物材料。
-實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,應(yīng)妥善處理廢棄物,以保護(hù)環(huán)境和人員健康。